在熒光顯微鏡的設計和選擇中,光源的搭配至關重要,它決定了儀器的使用范圍和成本,同時也反映了儀器的檔次。選擇合適的熒光光源,可以協(xié)調好激發(fā)、濾光、淬滅等熒光實驗問題,使成像效果相得益彰。
熒光顯微鏡的常用光源有高壓汞燈、氙燈,金屬鹵素燈和LED光源。
汞燈是一種在石英玻璃內部充入一定數量汞的高壓光源。發(fā)光機制是電間放電使燈泡內部水銀分子不斷解離還原從而發(fā)射光量子。因其發(fā)射很強的紫外和藍紫光,足以激發(fā)各類熒光物質,在顯微鏡中作為熒光光源應用較普遍。但汞燈壽命短(200-400h),光毒性大且需要一定的預熱時間,使用成本和操作便捷性掣肘了其一枝獨大。
氙燈和汞燈同為白光源,在光譜范圍上都占據優(yōu)勢。與汞燈相比,氙燈在使用壽命上有了很大的提升(壽命約為3000h),且激發(fā)平緩,對樣品損傷小。但其同樣具有啟動時間長、使用成本高等問題,能否滿足市場使用要求還有待考量;
金屬鹵化燈是一種接近日光色的節(jié)能冷光源,其具有發(fā)光效率高、光譜密集連續(xù)、顯色性能好、發(fā)熱少等特點,但其啟動需預熱,且燈泡填充物中含有汞、鉈等有毒物質,對人體和環(huán)境存在一定隱患。因而從使用的方便性出發(fā),市場未十分普及。
LED作為一種新熒光光源,開關在毫秒之間,啟停快速,光毒性低,大大減少了光照對樣品的損傷。寬光譜LED光源,集成多種光源的優(yōu)勢于一身,如鹵化燈的高光效及LED長壽命等特點,又克服了汞燈發(fā)熱及傳統(tǒng)LED光譜窄的缺點,節(jié)能環(huán)保,解決了汞燈及金屬鹵素燈帶來的二次污染問題,高光效低成本,具有較大的市場潛力。此外,寬光譜LED光源的燈珠結構,可以根據需要調節(jié)光源長度、寬度、照射角度等等,消除雜光干擾,實現照射,滿足不同的照射工藝要求,在刑偵痕跡鑒定、食品重金屬檢測、基因工程檢驗等領域應用已不鮮見。
廣州明美汲取了LED光源壽命長、光毒性低等性能優(yōu)勢,整合成應用于顯微成像領域的LED大功率寬光譜光源,用于替代傳統(tǒng)汞燈,光譜覆蓋廣、功率大、亮度高、即開即用,實現了顯微鏡LED多色熒光的應用,在生物學領域的科研檢測、工業(yè)分析領域的研究鑒定獲得了業(yè)界的認可。
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